Il Cenacolo di Fuligno, detto anche delle monache di Foligno, era così chiamato dal nome delle monache francescane provenienti dall'Umbria che lo occuparono a partire dal 1419.
Nella parete di fondo del refettorio è collocata l'Ultima Cena, affrescata alla fine del Quattrocento da Pietro Perugino e allievi ma scoperta solamente nel 1845 (e, al momento, attribuita a Raffaello). La scena si svolge in un portico dove è rappresentato, sullo sfondo, anche un altro episodio della Passione: l'Orazione nell'Orto.
La grande opera mostra una tavola a ferro di cavallo lungo la quale sono disposti Gesù e gli apostoli, seduti su uno scranno continuo con la spalliera tappezzata di verde; fa eccezione, come di consueto, Giuda, che si trova dall'altra parte della tavola di spalle e fa per girarsi verso lo spettatore. Sulla pedana sono riportati, a mo' di didascalia, i nomi dei convitati.

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